Hibridização e qPCR para Hanseníase
| Metodologia: • Hibridização de Sonda em Linha (LPA). • qPCR. |
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Amostra biológica:
• Fragmento de pele coletado em punch de 6 ou 4mm.
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Volume ideal:
• 01 fragmento de 6mm ou 02 fragmentos de 4mm.
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Período ideal de coleta:
• As amostras para investigação da Resistência Medicamentosa em Hanseníase, devem ser coletadas seguindo os seguintes critérios epidemiológicos:
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1. 10% dos casos novos de hanseníase multibacilares (MB) que apresentarem resultado do índice baciloscópico (IB) ≥ 2;
2. todos os casos de recidiva devidamente confirmados; e
3. casos em tratamento com suspeita de falência terapêutica.
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Orientações para a coleta de amostra:
• Todos os casos selecionados para a investigação da resistência deverão ser submetidos à biópsia de pele, a qual deverá ser realizada na borda da lesão mais característica e, preferencialmente, com biópsia de punção (punch) de 6mm.
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Obs.: Na impossibilidade de realizar nessa espessura/diâmetro (6mm), poderão ser coletadas duas amostras com punch de 4mm.
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| Conservação da amostra até o envio: • A amostra biológica deverá ser armazenada em tubo novo, com tampa de rosca (do tipo Eppendorf). Os tubos devem ser preenchidos com álcool a 70°GL ou 70% e não poderão conter espaço vazio, garantindo assim que toda a amostra fique imersa para melhor preservá-la. |
| Forma de acondicionamento para transporte: • Pode-se mantê-los em temperatura ambiente, os quais devem ser devidamente etiquetados, com data da coleta, nome completo e legível do paciente, sem abreviações, de acordo com sua documentação. |
| As amostras poderão ser enviadas para o LACEN em até 07 a partir da data da coleta, a qual precisará ficar em temperatura ambiente até o transporte ao laboratório. |
| Formulários requeridos: • Todas as amostras deverão ser cadastradas e encaminhadas pelo Sistema Gerenciador de Ambiente Laboratorial (GAL), assim como no Sistema de Investigação da Resistência Medicamentosa em Hanseníase (SIRH). Logo, deverá acompanhar a ficha de encaminhamento do GAL, ficha de notificação SINAN e cópia dos documentos pessoais. |
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Critérios para rejeição de amostras:
- Pacientes que não se encaixam nos critérios ou ausência de critérios;
- Amostras acondicionadas em formol;
- Amostra sem solução de conservação (álcool);
- Falta de identificação no tubo;
- Temperatura inadequada;
- Amostra fora do prazo de coleta (07 dias);
- Amostra sem cadastro.
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Tempo estimado para liberação de resultados:
• De 07 a 15 dias.
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